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購買前鑒別假冒偽劣ELISA試劑盒的方法:
一)、向廠家索要或從其網(wǎng)站下載說明書,查找ELISA的性能指標(biāo):準(zhǔn)確度(加標(biāo)回收率、稀釋線性)、精密度(板內(nèi)差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準(zhǔn)。一般來說,除了校準(zhǔn)不一定每份說明書都有外,其余的指標(biāo)一般都需要羅列(部分樣本需要高倍稀釋的,可能沒有準(zhǔn)確度這個(gè)指標(biāo))。如果無法提供這些性能指標(biāo),則說明該試劑盒可能是假貨,或者試劑盒開發(fā)過程不夠科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn),有可能無法檢測出真實(shí)的樣本值。
二)、對(duì)于夸大ELISA涵蓋的指標(biāo)的范圍,尤其是不常見的種屬,可先去國際ELISA試劑盒供應(yīng)商(如eBioscience、R&D)網(wǎng)站上搜索,如果搜索不到該種屬的ELISA試劑盒,則有可能是假貨,需要小心謹(jǐn)慎。
三)、將“廠家名”、“ELISA”和“假貨”等關(guān)鍵詞在網(wǎng)上搜索,有的網(wǎng)站或論壇如丁香園等會(huì)有打假曝光臺(tái)。
購買后鑒別假冒偽劣ELISA試劑盒的方法:
一、檢查說明書、包裝盒的質(zhì)量,通常假冒偽劣產(chǎn)品為了降低成本,印刷的質(zhì)量會(huì)比較差。其次仔細(xì)閱讀說明書,如上所示查找ELISA的性能指標(biāo)。
二、1. 利用干擾實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:
(1). 將針對(duì)試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液
(2). 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體
(3). 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物
(4). 實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對(duì)的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(5). 如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實(shí)際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對(duì)的是目的抗原。
2. 如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:
(1) 取出購買的試劑盒A的包被板兩條。
(2) 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(3) 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(4) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物。
(5) 實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測的同一個(gè)指標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(6) 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。
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